紫外可見(jiàn)檢測器靈敏度高,噪音低,線(xiàn)性范圍寬,對流速和溫度均不敏感,可于制備色譜。由于靈敏高,因此既使是那些光吸收小、消光系數低的物質(zhì)也可用UV檢測器進(jìn)行微量分析。但要留意活動(dòng)相中各種溶劑的紫外吸收截止波長(cháng)。假如溶劑中含有吸光雜質(zhì),則會(huì )進(jìn)步背景噪音,降低靈敏度。此外,梯度洗脫時(shí),還會(huì )產(chǎn)生漂移。
紫外可見(jiàn)檢測器檢測方式:
紫外可見(jiàn)檢測器檢測方式有直接紫外檢測、間接紫外檢測和柱后衍生化光度檢測等。
1、直接紫外檢測:使用的流動(dòng)相為在檢測波長(cháng)下無(wú)紫外吸收的溶劑,檢測器直接測定被測組分的紫外吸收強度。 多數情況下采用直接紫外檢測。
2、間接紫外檢測:使用具有紫外吸收的溶液作為流動(dòng)相,間接檢測無(wú)紫外吸收的組分。 在離子色譜中使用較多,如以具有紫外吸收的鄰苯二甲酸氫鉀溶液作為陰離子分離的流動(dòng)相,當無(wú)紫外吸收的無(wú)機陰離子被洗脫到流動(dòng)相中時(shí),會(huì )使流動(dòng)相的紫外吸收減小。
3、柱后衍生化光度檢測: 對于可與顯色劑反應生成有色配合物的組分(過(guò)渡金屬離子和氨基酸等),可在被測組分從色譜柱中洗脫出來(lái)后與合適的顯色劑反應,在可見(jiàn)光區檢測生成的有色配合物。
使用紫外可見(jiàn)檢測器檢測時(shí),為了得到高的靈敏度,常選擇被測組分能產(chǎn)生zui大吸收的波長(cháng)作為檢測波長(cháng),但為了選擇性或其它目的也可適當降低靈敏度而選擇吸收稍弱的波長(cháng)。另外,應盡可能選擇在檢測波長(cháng)下沒(méi)有背景吸收的流動(dòng)相。