wook500液相色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),填料技術(shù)自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒(méi)有想象中的這么簡(jiǎn)單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內徑和長(cháng)度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩定、均一的柱床,更多是一門(mén)藝術(shù),需要經(jīng)驗積累。
wook500液相色譜柱尺寸的選擇
較長(cháng)的色譜柱組分保留較強,運行時(shí)間較長(cháng),柱效更高,分離度效果更好。在實(shí)際工作中應綜合衡量運行時(shí)間和柱效,選擇長(cháng)度適宜的色譜柱。例如含量測定、溶出檢測對于分離的要求較低,可選用較短的色譜柱,減少運行時(shí)間;有關(guān)物質(zhì)一般選擇較長(cháng)的色譜柱,提高分離效果。
內徑小的色譜柱靈敏度較高,峰型更窄,但是載樣量較小。如果載樣量滿(mǎn)足要求,需要更高更尖銳的峰提高靈敏度,可以選擇更小內徑。但是如果進(jìn)樣量超過(guò)了柱載樣量,色譜峰將極大變寬。所以應在靈敏度和載樣量之間綜合衡量。
粒徑小的色譜柱分離度較好,壓力更大。如果5μm粒徑的色譜柱分離度稍有不足,則同型號3μm色譜柱的分離度一般會(huì )提供令人滿(mǎn)意的選擇性。
如果選擇較小尺寸的色譜柱,應衡量柱外死體積對柱效的影響,柱外死體積包括連接管線(xiàn)、進(jìn)樣體積、色譜柱接頭與色譜柱連接處的空隙等。所以一般超液相使用的色譜柱不適用于常規液相儀。小規格色譜柱使用同一品牌的儀器,減少連接處空隙引入的死體積。